對(duì)黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測(cè)卡檢測(cè)原理及試驗(yàn)方法進(jìn)行說(shuō)明
點(diǎn)擊次數(shù)：2301 更新時(shí)間：2018-12-22
黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測(cè)卡主要的結(jié)構(gòu)為二呋喃環(huán)及香豆素。目前已發(fā)現(xiàn)的20多種黃曲霉毒結(jié)構(gòu)之中，常見(jiàn)的有 AFB1、AFB2、AFG1、AFG2，其中黃曲霉毒素 B1(AFB1) 毒性zui強(qiáng)，被癌癥研究機(jī)構(gòu)IARC劃定為 IA類(lèi)致癌物。由于黃曲霉和寄生曲霉在自然界的分布很廣，而且很多食品基質(zhì)本身的濕度為菌落的繁殖和毒素的產(chǎn)生提供了有利條件，農(nóng)作物在田間受到黃曲霉的污染，收割后貯藏過(guò)程中如溫度和濕度適宜，黃曲霉孢子會(huì)大量繁殖產(chǎn)生更多的毒素，在糧食和飼料的貯藏過(guò)程中不可避免產(chǎn)生毒素。
黃曲霉毒素M1(AFM1) 時(shí)間分辨熒光免疫層析定量檢測(cè)卡應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析的原理，樣本中若含有AFM1，則在側(cè)向移動(dòng)的過(guò)程中會(huì)與熒光微球標(biāo)記的特異性單克隆抗體反應(yīng)，抑制抗體和NC 膜檢測(cè)線上AFM1 - MSA 偶聯(lián)物的結(jié)合。隨著樣本中AFM1 含量的升高，結(jié)合于檢測(cè)線上的抗體量減少，相應(yīng)的檢測(cè)線熒光強(qiáng)度也隨之變?nèi)?。使用時(shí)間分辨熒光免疫層析檢測(cè)儀讀數(shù)，可定量的測(cè)出樣本中AFM1 的含量。
黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測(cè)卡試驗(yàn)方法：
1、樣品的前處理：
取具有代表性的待測(cè)樣品500g，用小型粉碎機(jī)粉碎1min后過(guò)20目篩，收集過(guò)篩的細(xì)小樣品。稱取1.0±0.02g過(guò)篩的樣品于10mL離心管中，加入5mL提取液，用漩渦混勻儀震蕩5min(或者搖床振蕩10min)后，4000RPM離心1min，取上清。
2、檢測(cè)過(guò)程：
取50μL離心上清液加入500μL樣品稀釋液中，用漩渦混勻器混勻3-5s，然后取100μL加入到黃曲霉毒素B1熒光定量快速檢測(cè)卡的加樣孔中，置于37℃恒溫孵育器中溫育10min后，將試紙條插入熒光免疫定量分析儀中讀數(shù)，即為樣品的實(shí)際檢測(cè)濃度。當(dāng)檢測(cè)值大于5000μg/kg時(shí)，可用提取液將離心上清液稀釋5倍后再進(jìn)行檢測(cè)，所得讀數(shù)值乘以對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為終的檢驗(yàn)結(jié)果。
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