黃曲霉毒素免疫親和柱在操作上主要分以下三個流程
點擊次數(shù):1827 更新時間:2020-12-07
黃曲霉毒素免疫親和柱適合于和HPLC、LC-MS及AFB1酶免分析試劑盒結合使用,定量檢測AFB1。適用于谷物、食品、茶葉、飼料、中藥材等樣本中的AFB1凈化處理,提高樣品的純度,純化后的樣品可用不同的分析方法測定。
測定原理:
本產(chǎn)品測定的基礎是抗原抗體反應,抗AFB1的單克隆抗體連接在柱內凝膠介質上,樣品中的AFB1經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢通過AFB1免疫親和柱,在免疫親和柱內,AFB1與抗體結合,洗滌液通過免疫親和柱除去未被結合的雜質。后采用甲醇洗脫AFB1,然后進行相關分析。
1、樣品處理:參照GB 5009.22-2016中各法,對樣品進行處理;
2、凈化:以GB 5009.22-2016 為例說明;
a、柱子預處理:取出黃曲霉毒素免疫親和柱,恢復至室溫(22-25℃),將上端塞子取出,打開下端堵頭,將柱內保存液流掉至高于凝膠上界面3-5mm處,停止流液;
b、加樣:加入處理好的樣品液過柱,打開下端堵頭,調節(jié)流速支1-2滴/秒,棄去流出液。注:大米、玉米、小麥、花生及其制品、植物油脂:加處理好樣品15ml醬油、食醋:加處理好樣品10ml;
c、大米、玉米、小麥、花生及其制品、植物油脂樣品淋洗:液體*排凈后,用10ml蒸餾水,淋洗2次,棄掉流 出液;醬油、食醋樣品淋洗:液體*排凈后,用10mL 0.1%的吐溫-20的PBS溶液清洗,棄掉流出液;用10ml蒸餾水,淋洗2次,棄掉流出液;
d、吹干:利用真空設備,壓入空氣,將柱子中的水吹干;
e、洗脫:加入1ml甲醇,調節(jié)流速為2-3秒每滴,緩慢洗脫,收集全部洗脫液。
3、檢測:凈化后樣品可直接用ELISA,熒光和高效液相等方法進行檢測。